在基因测序的复杂世界里，“发夹”结构，即PCR引物中的反向互补序列，扮演着至关重要的角色，它们作为引物的关键部分，能够启动DNA聚合酶的合成活动，从而在目标序列上复制出互补的DNA链，这一精妙的设计也带来了挑战：发夹结构容易形成二级结构，干扰PCR反应的进行，导致非特异性扩增或产物减少。
为了克服这一难题，科学家们开发了多种策略，如优化引物设计以减少发夹结构的形成、使用高保真DNA聚合酶以增强对二级结构的耐受性，以及引入热启动技术以在反应初期避免非特异性扩增，这些努力不仅展现了“发夹”作为工具的潜力，也揭示了其在基因测序中可能引发的挑战，如何平衡“发夹”结构的利用与控制，成为基因测序领域一个值得深入探讨的课题。
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